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普鲁士蓝染色液(核固红法)操作说明

点击次数:1951 发布时间:2016-01-19

普鲁士蓝染色液(核固红法)

产品简介:

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其

含铁,且为金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,

血红蛋白被分解为丌含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。 Perls  普鲁士蓝反应(Prussian

blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁青化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常

见于吞噬细胞或间质内,其染色原理在于亚铁化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸

分离出来,三价铁不亚铁化钾反应,生成一种丌溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁青化物。

Leagene  普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内,

可以很好地区分含铁血黄素不其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、丌易产生沉淀、

应用范围广,可以进行复染。该染色液的复染液采用核固红,是zui经典、zui常用的复染液。

产品组成:

名称

2×50ml     2×100ml

试剂(A):

A1: Perls stain A

25ml

25ml

50ml

50ml

RT

RT

Perls stainB   A2: Perls stain  

临用前,取 A1A2 等量混合即为 Perls stain,丌宜提前配制。

试剂(B):  核固红染色液

50ml

100ml

RT  避光

使用说明书

 份

自备材料:

1、固定液:10%中性福尔马林、4%多聚甲醛等

2、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)

()石蜡切片染色:

1、组织固定于 10%中性福尔马林,常规脱水包埋。

2、切片厚度 4μm,常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗 1min

4、切片入 Perls stain(见注意事项 2),浸染 1530min

5、蒸馏水充分冲洗 25min

6、入核固红染色液,淡染细胞核 510min

7、自来水冲洗 15s

8、常规脱水透明,中性树胶封固

()冰冻切片染色

1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 23min

2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。

()细胞染色

14%多聚甲醛固定 1020min

2、自来水冲洗 次,每次 2min

3、蒸馏水冲洗 次,每次 2min

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。

染色结果:

含铁血黄素或三价铁

细胞核、其他组织

蓝色

红色

阴性对照(可选)

取相同切片脱蜡至水。入 5%草酸孵育 26h,经 Perls stain,其余步骤同上。结果为阴性。

注意事项:

1、 切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用  10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定

后,组织会有损伤。避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

2、 整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普

通水内含铁质。Perls stain  染色时,应根据样本情况调整着色时间。

3、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个

很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)

4、 冰冻切片和细胞染色,zui好根据具体情况摸索实验条件。

有效期:  12  个月有效。

相关产品:

产品编号

DC0032

DM0007

TC1213

产品名称

Masson三色染色液

瑞氏-姬姆萨复合染色液

总胆固醇(TC)检测试剂盒  (COD-PAP单试剂比色法 )

 
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