氨基酸的测定

 价谷物和其它作物产品以及饲料的营养价值时，需要 测定氨基酸的总量及全氨基酸中各个氨基酸的含量。 测定氨基酸总量的方法与蛋白质测定有密切关 系，许多测定蛋白质全氮含量的方法如凯氏法及各种 比色法均可用于测定氨基酸的总量.比较常用的方法 为布三酮比色法及各种色谱法。应用zui早的纸层析法， 设备操作简单，但分离效果差，难于定量;薄层层析，层 析速度快，灵敏度比纸层析高。气相色谱法，分析速度 快、灵敏度高，唯分析前必须将氛基酸转化为易挥发的 衍生物，才能测定。有一些氨基酸容易热分解，影响定 量结果。液相色谱（HPLC）法对氨基酸分析是一 种快速而可靠的方法。 带三明比色法在一定pH值下，游离氨基酸与 水合布三酮反应，生成蓝紫色的苟二酮炔一茹二酮胺 （diketohydrindy lidene diketohydrindamine，简称DY- DA）。其颜色的深浅与氨基酸含量成正比。据此，可用 分光光度计，在波长570纳米下，测定DYDA的吸收 值。用以计算试样中氨基酸的含量。 氛基酸自动分析仪法见氮基酸分析仪。 液相色谱法通常将氨基酸转化为具有荧光 的DNS一氨基酸（是荧光试剂DNS一CI二甲基氨基蔡 磺酞氛与氨基酸结合成的衍生物），以荧光检测器测定 氨基酸。下图是DNS一氨基酸液相色谱图，是用 荧光检测器鉴定的。从图中可以看出，使用液相色 侧眼识似贫斗 氮蓦酸的测定（determination。f。mino- acid）对植物样品中一类含氨基的有机化合物进 行定量分析的过程。测定植物生育期中体内氨基酸的 含量，对于研究根系生理、氮素代谢有重要作用。在评 DNS一氮墓酸液相色谱图 1.DNS一Cl;2.DNS一酞胺;3.异亮氮酸;4.亮氮酸 5.顺氮酸;6，脯氛酸;7.苯丙氛酸，8.蛋氨酸;9.丙氛酸; 10.赖氮酸.11.酪氮酸;12.甘氮酸;13.色氮酸14.谷氮 酸;15.苏氮酸;16.丝氮酸;17.门冬教酸;18.为l~17 的化合物;19.脱氛酸，20.组氛酸;21.精氮酸 谱法，结合荧光检测技术可以有效的分离及测定氨基 酸。选择激发波长为 340纳米，发射波长为51。纳米。 也有将氨基酸生成有紫外吸收的衍生物，用紫外检测 器检测;用得zui普遍的是制成苯基海硫因氨基酸 、r:”氨基酸》。不但便于紫外检测，而且也是测定多 肤和蛋白质中氮基酸顺序的重要技术。